Paraziták a széklet mikroszkópiájában


Content uploaded by Judit Plutzer Author content All content in this area was uploaded by Judit Plutzer on May 31, Content may be subject to copyright.

Alapvető paraméterek

Giardia duodenalis és Cryptosporidium spp. Török Tamásné dr. Országos Környezetegészségügyi Intézet, Budapest A biztonságos, egészséges ivóvíz mindenki számára létfontosságú.

Share on Twitter Az ürülék elemzését a gyomor és a bél emésztőrendszerének meghatározására koprogramnak nevezzük.

Patogének megjelenése az ivóvízben az utóbbi időben egyre nagyobb problémát jelent világszerte. Az Európai Unió nagy hangsúlyt fektet ezeknek a patogéneknek a jelentőségére és támogatja az olyan irányú törekvéseket, hogy minél jobban megérthessük és kontrollálhassuk ezeknek a fertőző ágenseknek a jelenlétét vizeinkben.

Milyen élősködők szaporodhatnak el a belekben és milyen tünetekkel járhatnak?

A project fókusz alá helyezi a legfontosabb patogén vírusokat, baktériumokat és protozoákat reprezentatív európai vízműveknél, és vizsgálja azok emberi egészségre gyakorolt hatását. Paraziták a széklet mikroszkópiájában cél megvalósítása érdekében az alábbi feladatokat tűzte ki: a nukleinsav alapú kimutatási technikák validálása és alkalmazása, molekuláris felmérés és összehasonlító tanulmányok európai ivóvízellátókban, epidemiológiai felmérések, valamint összefüggések keresése az epidemiológiai, molekuláris és egyéb környezeti adatok között.

Cryptosporidium biológiája A Cryptosporidium rendszertanilag paraziták a széklet mikroszkópiájában Apicomplexa törzs, Sporozoae osztály, Eucoccidiida rend és Cryptosporidiidae család tagja, ámbár a legfrissebb biokémiai, genetikai és egyedfejlődési adatok rendszertani kérdéseket vetettek fel, melyek még megoldásra várnak. Jelenleg 17 faja ismert: 2 halakban C. Az SSU rRNA alapú molekuláris vizsgálatok alapján megközelítőleg 54 genotípust írtak le, melyek rendszertani helyzete bizonytalan és további vizsgálatokat igényel elhelyezésük Xiao et al.

A Cryptosporidium parvumot több szubtípus csoportra különíthetjük paraziták a széklet mikroszkópiájában a glikoprotein prekurzor fehérjét kódoló DNS szekvencia paraziták a széklet mikroszkópiájában, melyekből kettő, a IIa és IId szubtípus csoportok vesznek részt a zoonózisban Strong et al. A gazdaszervezetbe jutva a Cryptosporidium parvum oocisztából négy fertőzőképes sporozoit szabadul ki epesók és emésztőnedvek hatására, melyek a bél epitélsejtjeinek felszínére tapadnak. A kialakuló trophozoit a fertőzött ileumban az epitélsejtek felszínéhez közel, intracellulárisan található, dezmoszómaszerű kapcsolata van a sejtekkel és ezen keresztül veszi fel a gazdasejtből a táplálékot.

Ebből alakul ki az 1. A merozoitok szétszóródnak, majd a bélfalhoz tapadva 2.

Discover the world's research

Ezekből 4 merozoit keletkezik, melyekből gametociták fejlődnek. A gametocitákból ostor nélküli makro- és mikrogaméták alakulnak ki. A gaméták összeolvadása után kialakuló vastag falú oociszták a széklettel ürülnek, a vékony falú oocisztából kiszabaduló sporozoitok révén pedig a bélben újabb ciklus indul el Carey et al. A kriptosporidiozis a giardiozishoz hasonlóan napig tartó paraziták a széklet mikroszkópiájában hasmenést esetleg hányingert, hányást, fejfájást, izomfájdalmakat, lázat jelent, előfordulhat kiszáradás és leromlott állapot, elerőtlenedés.

Kezelés nélkül spontán gyógyul. A fertőzés immunhiányos betegeknél AIDS betegek halált is okozhat. Állatoknál tünetet leginkább akkor okoz, ha az állat fiatal illetve ellenálló képessége lecsökkent alultápláltság, elválasztás, zsúfoltság, hideg, fröccstej hiánya, egyéb társfertőzések.

Tünetmentes oociszta ürítés is lehetséges Xiao et al. A Giardia egy eukariota, ostoros, két sejtmagvú egysejtű. Paraziták a széklet mikroszkópiájában a Protozoa törzs, Sarcomastigophora altörzs, Zoomastigophora osztály, Diplomonadida rend és Hexamitidae család tagja.

Jelenleg 6 faját ismerjük, melyből 1 kétéltűekben G. Ez utóbbi faj genetikailag meglehetősen heterogén: az Assemblage A-t és B-t emberben és emlősökben, az Assemblage C-t és az Assemblage D-t kutyákban, az Assemblage E-t háziállatokban főképpen szarvasmarhábanaz Assemblage F-et macskákban, az Assemblage G-t pedig patkányokban találták meg.

Az A paraziták a széklet mikroszkópiájában B genotípusokon belül további szubgenotípusok különíthetőek el.

Általános székletelemzés

A Giardia sejt a paraziták a széklet mikroszkópiájában vékonybél kezdeti szakaszán, epicellulárisan található. Ez a paraziták a széklet mikroszkópiájában alak szívófelületével a bélhámsejtekre tapad. Növekedés, osztódás után encisztálódik. Ezt a folyamatot az organizmus számára kedvezőtlen körülmények, illetve a gazdaszervezet immunválasza indukálják.

Az új szervezetbe került ciszta vegetatív formává alakul és kezdődik a folyamat elölről. Sárga, bűzös hasmenés, puffadás, hányinger, étvágytalanság, gyengélkedés, esetleg láz, a székletben megjelenő vér a heveny giardiozis velejárója.

A tünetek elhúzódhatnak kezelés nélkül akár évig isfokozódhatnak, enyhülhetnek. A fertőzés krónikus formába is átmehet. Állatoknál fejlődési visszamaradást okozhat, de halálos kimenetelű giardiozisról is beszámoltak már.

szalagféreg- diagnosztikai kezelés

Cryptosporidium és Giardia előfordulása vízellátókban A Cryptosporidium és Giardia fertőzés terjedhet emberről emberre fekál-orál úton, állatról emberre a hordozó állatoktól. A indirekt, vízzel közvetített fertőzésnek kiemelt a jelentősége, mivel fürdőzéskor vagy ivás során a kórokozó közvetlenül a bélcsatornába juthat.

A vizek szennyeződését a szennyvizek szabadba vagy fogadóba engedése okozza, illetve a paraziták a széklet mikroszkópiájában főként fiatal állatok ürülékéből kerülhetnek a protozoonok cisztái, oocisztái a nyersvízbe. Ennek kockázata az állattartó telepek környékén, tavasszal, az esőzések miatti árvizek idején a legnagyobb, ekkor az újszülött állatok száma is nagy.

Bélférgek, bélférgesség

Számos tényező hozzájárul a vízeredetű járványok, fertőzések kialakulásához: A Cryptosporidium és Giardia oo ciszták fertőző dózisa kicsi ciszta illetve oociszta. A Cryptosporidium oociszták mérete csupán µm, könnyen átjuthatnak a víztisztítás során a szűrőkön.

Az eltávolítás csak koaguláció és mikroszűrés 0, µm nagyságú részecskék eltávolítása vagy ultraszűrés 0,01 µm nagyságú részecskék eltávolítása alkalmazásával hatékony. Az oo ciszták nagyon ellenállók, mind vízben, mind talajban hetekig életképesek maradnak.

Az a fertőtlenítőszer koncentráció, ami baktériumokhoz elegendő, a protozoonokhoz nem, az oo ciszták életképtelenné tételéhez különleges eljárás, ózon illetve UV alkalmazása szükséges. Ezek a technológiák paraziták a széklet mikroszkópiájában legtöbb kis vízműnél nem találhatók meg 1,2.

Ahhoz, hogy a Giardia és Cryptosporidium vízben való jelenlétének jelentőségét felbecsüljük rendszerszemléletre van szükség: a protozoonok vízből való pontos kimutatása mellett szükség van a vízgyűjtő területek védelmére, a víztisztítás optimalizálására és a tisztított ivóvíz védelmére egészen a fogyasztói felhasználásig. A paraziták vízből történő koncentrálásához speciális Filta-Max szivacsszűrést és Millipore illetve Macherey-Nagel membránszűrést használtunk, nagy turbiditású vizek esetén pedig kálcium-karbonátos flokkulációt.

A szivacsszűrőből illetve a membránszűrőről az oocisztákat foszfátpufferrel mostuk le. Centrifugálással a mintákat tovább koncentráltuk, végül az oo cisztákat immunomagnetikus szeparációval IMS választottuk el a törmeléktől. A Giardia ciszták székletből történő dúsításához immunomagnetikus szeparációt. A mikroszkópos vizsgálathoz epifluorescens és differenciál interferencia kontraszt mikroszkópiát használtunk.

A Giardia GSA 65 nevű fehérje kimutatása székletmintákból a Prospect T Giardia microplate assay-el történt a gyártó utasításai szerint. A DNS extrahálást Qiagen Stool kittel és Mini kittel végeztük a gyártó utasításai szerint, 10 olvasztási és fagyasztási ciklus beiktatásával az oociszták szétroncsolására. Nested illetve seminested PCR módszert alkalmaztunk mindkét protozoon esetében. Gyokergubacs fonalféreg elleni vedekezes PCR targetjei: a Cryptosporidium SSU rRNA illetve bp hosszú szakaszai a faj és genotípus meghatározáshoz, a Cryptosporidum glikoprotein 60 prekurzor fehérjét kódoló gén bp hosszú szakasza a szubgenotípus meghatározáshoz, illetve a Giardia 18S rRNS bp hosszú szakasza faj és Assemblage meghatározáshoz és a glutamate paraziták a széklet mikroszkópiájában kódoló gén bp hosszú fragmentje a szubtípusok meghatározásához.

Teljes projekt lista

A keletkezett termékek azonosságát gélektroforézissel ellenőriztük. A keletkezett termék azonosságát olvadáspont analízissel ellenőriztük. A keletkezett termékeket gélelektroforézissel és Agilent Chip DNS analízissel a Bioanalyser készüléken végeztük a gyártó utasításai szerint. A PCR termékek plazmidba ligálása Promega pGEM-T vektor felhasználásával történt a gyártó utasításai szerint, majd a plazmidot transzformáltuk Escherichia coli DH5α sejtekbe paraziták a széklet mikroszkópiájában a sejteket felszaporítottuk.

A plazmid izolálása a felszaporított Escherichia coli DH5 alfa sejtekből a Qiagen Plazmid Mini Kit felhasználásával történt a gyártó utasításai szerint. A szekvencia elemzéséhez és szerkesztéséhez a Chromas programot, a szekvenciák összehasonlításához a A férgek fertőzőek programot, filogenetikai fák létrehozásához a www.

Az egyedi illetve reprezentatív szekvenciákat feltöltöttük a génbankba és a génbankból referencia szekvenciákat is felhasználtunk a saját szekvenciák elemzéséhez.

Az összesen 36 mintából a protozoon koncentrálás után a minták feléből festés után mikroszkópos azonosítást végeztünk, majd a minták második feléből DNS extrahálás után a Cryptosporidium és Giardia SSU rRNS gén egy szakaszát szaporítottuk fel külön PCR reakcióban. A PCR termékeket szekvenáltuk, majd a kapott szekvencia analízise során állapítottuk meg a jelenlevő Giardia illetve Cryptosporidium fajt illetve genotípust.

Giardia esetében a szubtípusok meghatározására a glutamát dehidrogenázt kódoló PCR termékeket is analizáltuk. A szekvencia analízis alapján egy a Balatonba ömlő kisvízfolyásban új szubtípust azonosítottunk a G. Mindegyik megtalált faj humán patogén. A molekuláris analízis alapján a szennyvizek hatása az ivóvíznyerő helyekre jól nyomon követhető.

Két helyen a szennyezés forrása ismeretlen.

paraziták a széklet mikroszkópiájában

Giardia epidemiológiai felmérés két településen Az epidemiológiai felmérés célja a Giardiával fertőzött ivóvíz fogyasztása és az aszimptomatikus giardiozis kialakulása közötti lehetséges kapcsolat kimutatása volt.

A felmérésben 3 település vett részt.

Bélféreg – Hogyan szabaduljunk meg tőle?

Közülük kettő, nyers- ill. Budapest szolgált kontrollként, paraziták a széklet mikroszkópiájában ennek ivóvízében a rutin vízminőség vizsgálatok soha nem mutatták ki a protozoonok jelenlétét. A vizsgálat céljaira a három település állandó lakosaitól székletmintát gyűjtöttünk A mintaadással egyidőben a vizsgálati alanyok egy életkörülményekre és szokásaikra vonatkozó validált kérdőívet is kitöltöttek.

pinworms a szemében fonalféreg elleni gyogyszer

Ezzel párhuzamosan a települések nyers- és ivóvízéből is történt mintavétel, amelyet a fent leírt módszerekkel vizsgáltunk a protozoonok jelenlétére. A három településen gyűjtött humán székletminták közül a fent leírt antigén kimutatási teszttel és immunofluorescens mikroszkópiával az egyik településen 4, a másik településen és budapesti széklet mintákban esetben volt Giardia pozitív a vizsgálat.

A négy pozitív székletmintában az első településen egyszer Assemblage A, egyszer Paraziták a széklet mikroszkópiájában B és kétszer koinfekció volt kimutatható. Ezzel ellentétben a második településen és a kontroll városban Budapest egy-egy székletmintában G.

Paraziták a széklet mikroszkópiájában kontroll városban a fertőzött személy valószínűleg utazásai során Ázsiában betegedett meg, míg a két faluban a fertőzött személyek nem számoltak be külföldi tartózkodásról.

Az első településen, ahol az ivóvízforrásban a G. Az eredmények egy specifikus epidemiológiai szituációt mutatnak és jelentős információt hordoznak az aszimptomatikus giardiozissal kapcsolatosan.

Bélféreg - Így szabaduljunk tőle! | BENU Gyógyszertárak

A parazita kruger jelentősége, összefoglalás A giardiozis paraziták a széklet mikroszkópiájában kriptosporidiozis elterjedése az emberi populációban egyre nagyobb problémát jelent világszerte.

Ezeknek a patogéneknek a cisztái, oocisztái megjelenhetnek az ivóvízellátásban, rekreációs helyeken, a mezőgazdasági felhasználású vizekben. Fejlett országok nagyobb sikerrel kontrollálják ezeknek a protozoonoknak a jelenlétét a vizekben, bár a vízminőségi problémák — ha kisebb számban is — de jelen vannak. Továbbá humán patogén Giardia duodenalis csoportokat és Cryptosporidium fajokat valamint egy új Giardia szubtípust azonosítottuk.

paraziták a széklet mikroszkópiájában rajzfilmek gyermekek férgeiről

Az eredmények nagymértékben hozzájárulnak az ember egészségének védelmében teendő intézkedések meghozatalához. A jelenlegi tanulmány elsőként alkalmazza a Giardia és Cryptosporidium szimultán kimutatását és genotípizálását a magyar vízellátókban. Ugyanakkor azt is bemutatja, hogy mil.

paraziták a széklet mikroszkópiájában